質譜儀-Mass 以固相微萃取(SPME)及氣相層析質譜儀(GCMS)分析自製啤酒的香氣風味來源
啤酒中迷人的香氣,來自於不同主原料組合、天然添加物,釀造出千萬種風味變化。用於家庭啤酒釀造的發酵罐配有氣閘,該氣閘由液體屏障組成,使發酵氣體能夠逸出,同時防止來自大氣中微生物的污染。在發酵最旺盛的階段會產生大量的二氧化碳,此階段為將大麥酵母添加大麥產生的麥芽汁後24小時內發生。由氣閘排放的氣體具有令人愉悅的香氣,不同啤酒在發酵的初始階段都是獨特的過程。利用固相微萃取(SPME)串聯氣相層析質譜儀(GC / MS),來分析發酵氣體中所含的揮發性成分,解開迷人風味的來源。
使用11.5磅的2-row(二綾麥)麥芽和1.5磅的苦黑麥芽釀造5加侖啤酒。在煮沸的不同階段添加了本土的Homegrown, Columbus, Chinook, Centennial啤酒花,以增加苦味和香氣。將Wyeast 1098 British Ale酵母添加到冷卻的麥芽汁,在大約21.1°C(70°F)的溫度下進行發酵。
酵母發酵在24小時內劇烈進行,將SPME Arrow懸掛在氣閘上方,每10分鐘來採樣發酵氣體。樣品收集後,將SPME Arrow手動注入GC進樣口。使用配備有SPME襯管和層析管柱以氣層析質譜儀JEOL Q1500GC進行分析。
MS JEOL Q1500GC | |
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Ion source temp. | 250℃ |
Interface temp. | 250℃ |
Ionization mode | EI+:70eV, 50µA |
Scan step | +525V |
Measurement mode | SCAN, m/z 35-500, 0.1 step |
Acquistion rate | 2.176 spectra/second |
Mass Spectral Database | NIST17, version 2.3 |
SPME | |
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SPME Fiber | SPME Arrow |
Injector accessory | Manual Injectioin Kit SPME Arrow Conversion Kit |
GC | |
GC column | Rxi-5Sil MS |
GC inlet temp. | 280℃ |
GC inlet septum, liner | Thermolite Plus SPME Topaz liner |
Inlet mode | Splits 50:1 |
Carrier gas | He, 1 mL/min (Constant flow) |
Oven temp. | 40℃(1min)→10℃→300℃(0 min) |
JEOL Q1500單四極桿質譜儀在電子電離(EI)源和70 eV的電離電子能量下運行。在m / z 35至m / z 500的範圍內採集質譜,並使用JEOL數據處理軟件在NIST17質譜數據庫中進行搜索確認化合物。
▲圖一. 自製啤酒發酵氣體的香氣成分
圖1顯示了在發酵罐氣體中檢測到的香氣成分,主要成分是啤酒花揮發物,而發酵副產物乙酸乙酯,異戊醇和乙酸異戊酯(香蕉油),因為較小的峰是較早的洗脫時間。-myrcene是啤酒花香氣的主要貢獻者,在這裡使用的啤酒花品種中佔25%至55%。-myrcene也是從氣閘逸出的發酵氣體中檢測到的最豐富的揮發性成分,啤酒花中次要的供獻者為-pinene, -terpinene, limonene, sylvestrene及humulene。雖然乙醇在此階段已產生,但在沒有在氣鎖的香氣中檢測到,可能被困在氣鎖液屏障中。
總結來說淡啤酒發酵的前24小時,氣鎖中香氣的主要貢獻來自啤酒花的揮發物,發酵副產物的含量較低。這個結果我們能了解到淡啤酒light beer在發酵過程中,由於釋放出的二氧化碳會使啤酒花揮發物的損失,而減少風味,通常會在發酵之後再添加啤酒花(乾啤酒花)來增口啤酒風味的原因,例如印度淡啤酒India Pale Ales (IPAs)。
▼圖二. 推薦使用JEOL日本電子JMS-Q1500GC 氣相層析質譜儀
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